摘要：从广西武宣地区的红曲米中分纯得到7株红曲霉纯培养。初步鉴定分属3类：m-1、m-2、 m-6属于紫色红曲霉类，m-4、m-5属于红色红曲霉类，m-3、m-7属于丛毛状红曲霉类。发现m-1菌株具有较为突出的红曲色素产生能力，通过形态观察和耐酒精、耐nacl实验，对m-1菌株进行了种的鉴定。

关键词：红曲米；红曲霉；分纯；鉴定 

中图分类号：ts201.3                        文献标识码：a

自1884 年van tieghen 首次分离出红曲霉，至今已有百年的历史。近几年红曲霉的许多功效相继被证实后，红曲菌的相关专利陆续出现。自1975年至1997年为止各国关于红曲霉的专利将近200 篇[1]。目前红曲色素应用是红曲研究的主要方向，近20年有近40%的专利都在此领域。1979 年红曲霉被发现可产生胆固醇合成抑制剂，红曲霉降血糖、血压及胆固醇功效即成为众人关注的焦点 [2]。

另外作为食品添加剂也是红曲应用的主要方向，有关添加红曲成为功能性食品的专利有31篇，且多在日本申请。还有用于生产各种酶的专利15篇，以及在化妆品、处理废水、饲料上的应用[3]。对红曲霉的研究已从红曲色素扩展到有关降血压、血糖及胆固醇，红曲霉抗菌作用等多个方面。

本论文报道了对广西所产红曲米中红曲霉的分离纯化工作。对广西武宣一带的红曲米中的红曲霉进行分纯，得到了7个纯培养，进行了属的鉴定。发现其中一株有较为突出的抗菌能力（另文发表）；还有一株有较为突出的产红曲色素能力。研究成果扩大了红曲霉的菌种库，为发掘红曲霉生物资源做了有益工作。

1  实验材料

1.1  红曲米：取自广西武宣地区，是居民制作红糟酸所用的发酵剂。

1.2  培养基：富集活化液：120bx米曲汁900ml，乳酸7ml，无水乙醇100ml，于121℃灭菌20min，使用时以无菌操作加入30ppm链霉素。分纯培养基: 120bx米曲汁900ml，6％nacl，2％琼脂，121℃灭菌30min。

2  研究方法

2.1  红曲霉的分纯与鉴定：取红曲米25粒放入100ml富集活化液中，30℃培养５天。采用

米曲琼脂汁培养基，对数稀释倾注法分纯。以无菌操作将生长迅速、健壮的菌落，挑取放到

富集活化液中继续富集活化，待培养5天后重复上述分纯操作，经过多次操作就可以分离得

到红曲霉纯培养。

    通过菌落形态、菌丝体形态观察，耐酒精、耐nacl实验，进行红曲霉纯培养的鉴定。

2.2  红曲霉产红曲色素的研究：用米曲汁培养基，遮光，32℃，160r/min 培养六天。用分光光度法测定总色价。

3  实验结果

3.1  红曲霉的富集活化

活化培养的第二天，红曲米开始有附着的白色菌丝；第三天红曲米上浮，米身附着大量菌丝；第四天红曲米全部上浮，菌丝开始粘连；五天以后出现白色菌膜；七八天后白色菌膜转变为红色。根据菌体质量测定，红曲霉生长对数期大约处于第五、第六天，最适合用作接种材料。

3.2  红曲霉的分离鉴定：

3.2.1  菌落形态特征。红曲霉培养初期都为白色小菌落，经过培养后，菌落开始老熟，表面的颜色变化比较丰富，有的菌落颜色开始改变，逐渐变成橙色、浅蓝色、灰色、铅灰色和灰白色等；菌落的主要形状为皮膜状和绒毯状，大多菌落有放射状的沟纹，边沿一般比较整齐。得到7个纯培养，菌落特征见表1。

表1　 7株红曲霉纯培养的菌落形态

菌株   菌落大小   正面形态      皱折      颜色    侧面观     背面颜色    

编号    (mm)                                  

m-1     38       圆形绒垫状    辐射状     红色      凸起      深红色

m-2