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木聚糖酶产生菌的选育研究论文

栏目:工矿企业发布:2007-06-09浏览:2809下载180次收藏
摘  要:  经过两步平板分离法,筛选到1株木聚糖酶高产菌,三角瓶发酵培养后,测得该菌的酶活力为0.2535u/ml,酶最适反应温度为60℃,最适反应的ph值为6.0。 关键词:两步平板分离法;木聚糖酶;选育      作者简介:成显波(1982-),男,广西罗城人,工学学士,广西大学2004级硕士,从事蔗渣浆木聚糖酶辅助漂泊研究。         木聚糖酶是一类木聚糖降解酶系,属于水解酶类,包括内切β-木聚糖酶、外切β-木聚糖酶和β-木二糖苷酶。自然界中,能合成木聚糖酶的微生物有细菌、放线菌和真菌。木聚糖酶用于纸浆漂白是用木聚糖酶来降解木素 — 碳水化合物的复合体,为后续漂白段提供条件[1]。     常规含氯漂泊的制浆造纸工业因严重污染环境和威胁人类健康,受到了政府和人们的高度重视,控制污染、减少危害势在必行。北欧和北美等国家的多家纸厂在制浆过程中成功采用木聚糖酶生物漂泊纸浆,有效的控制了环境污染和提高的纸品质量。而我国对木聚糖酶助漂的研究起步较晚,目前尚处于实验室研究阶段,由于所选菌株本身的适应性及所产酶的性质等方面的问题,工业应用尚未形成规模[2]。这种高投入、高风险、低回报的行业特性,使得木聚糖纸浆助漂研究往往是止步不前。     本研究以广西支柱产业——造纸制浆业为研究方向,采用低成本的两步平板分离法从大自然筛选能分解蔗渣木聚糖、用于蔗渣浆辅助漂泊的产酶菌,并研究该菌粗酶液的特性。目的是为工业化应用木聚糖酶助漂制浆提供理论依据。 1  料和方法 1.1  材料 1.1.1  土样      从广西大学农场甘蔗地、南宁糖纸厂和良庆造纸厂堆料场处采样分离 1.1.2  试剂     木聚糖:华木木聚糖,sigma 公司。     蔗渣半纤维素:从蔗渣中制备提取。 1.1.3  培养基     富集培养基(%):蔗渣半纤维素3.0,蛋白胨 0.5, nacl 0.5,ph自然。      分离培养基a(%):蔗渣半纤维素3.0, kno3 0.1,mgso4.7h2o 0.05,nacl 0.05, k2hpo4   0.05, 琼脂 2, ph 9.5。     分离培养基b(%):华木木聚糖3.0, kno3 0.1,mgso4.7h2o 0.05,nacl 0.05, k2hpo4   0.05, 琼脂 2, ph 9.5。     斜面培养基(%):牛肉膏0.5,蛋白胨1, nacl0.5, 琼脂 2, ph自然。     种子培养基(%):蔗渣半纤维素1.0,蛋白胨 1.0, nacl 0.4, mgso4 0.05,      k2hpo4  0.05, ph 8.5。  &
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