柴雪萍，梁光哲，刁蓝宇，吴智超，梁明振*

（1.广西大学动物科学技术学院，广西南宁 530004；2.广西宜坤奇饲料有限公司，广西南宁 530001）

随着生活质量不断改善，人们对食品安全的要求越趋严格，尤其对肉、蛋、奶等产品。植物提取物能提高畜禽饲料转化率、改善肉品质，对机体的免疫调节、抗氧化等方面有十分重要作用，且植物提取物含多种有效成分，能增强机体的自愈和抗应激能力。槐角和丁香是我国传统中药材之一，具有一定抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用，同时能增强免疫力、改善认知障碍等，临床上常用于治疗肠热便血、肝热头痛等疾病；槐角含有黄酮类（芦丁、槲皮素）和异黄酮类化合物（染料木素、染料木苷、槐角双苷），黄酮类化合物具有护肝、抗自由基、抗氧化、抗癌等作用；异黄酮类化合物能改善机体免疫机能，是当前国内外学者研究的热点。丁香能促进胃液分泌，增强胃肠蠕动，保肝、解毒、抑菌等作用。丁香的化学成分主要有黄酮类、三萜类、苯丙素类等，黄酮类成分有良好的抗氧剂活性、抗炎、抗癌、抗衰老等作用，在国家公布的药食两用原料中名列第一。本文旨在研究不同水平植物提取物对三黄鸡抗氧化性能和脂质代谢的影响，探讨植物提取物在三黄鸡上的应用效果及地方品种鸡生产上应用的可行性。

1.1 试验设计 采用单因素完全随机分组设计，选取体况一致、体重（0.56±0.01）kg 且发育良好的45 日龄三黄鸡母鸡256 羽（广西玉林市兴业县和丰禽业有限公司），随机分为4 组，每组4 个重复，每个重复16 羽，各组分别在基础日粮中添加0（对照组）、150、200、300 mg/kg 丁香和槐角提取物，预试期5 d，正试期为70 d。丁香和槐角提取物由北京康华远景科技股份有限公司提供，活性成分为糊精（载体）、总黄酮2.0%、总多糖3.5%。基础饲粮为玉米-豆粕型，参考三黄鸡的饲养标准并结合生产实践拟定营养需要，基础饲粮组成及营养成分见表1。

表1 基础饲粮组成及营养成分

1.2 饲养管理 试验期采用笼养方式，每天08:00 和15:00 饲喂，保证充足饮水，饲养管理和免疫程序按三黄鸡常规方法进行，定期消毒，每天观察鸡群健康状况，并记录死淘数。

1.3 样品采集 试验期共采样2 次，于80 日龄为第1 次采样，测定血清抗氧化指标；于120 日龄为第2 次采样，测定血清抗氧化指标和血脂脂质代谢指标。采集的样品于室温下倾斜放置0.5 h，3 000 r/min 离心10 min，制备血清，并将血清转移至2 ml 离心管中，于-20℃保存备用。

1.4 检测指标及方法

1.4.1 生产性能 饲养期间以重复为单位对试验鸡进行空腹称重（称重前停饲12 h），并记录作为试验初始体重，在试鸡120 日龄禁饲12 h 后按重复称重，作为试验末期体重，试验期间准确记录试鸡的喂料量、剩料量和死淘数，计算平均日采食量（adfi）、平均日增重（adg）、耗料增重比（f/g），计算公式：

1.4.2 血清抗氧化和血脂代谢指标 血清抗氧化指标丙二醛（mda）、超氧化物歧化酶（sod）、谷胱甘肽过氧化物酶（gsh-px）、过氧化氢酶（cat）、总抗氧化能力（t-aoc）以及血脂代谢指标甘油三酯（tg）、胆固醇（cho）、高密度脂蛋白（hdl）、低密度脂蛋白（ldl）使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定。

1.4.3 脂质代谢基因相对表达量 采用trizol 法提取胸肌和腿肌组织rna，参照tian kit 反转录试剂盒提取cdna 作为模板，采用实时荧光定量pcr 法测定脂肪酸合成酶（）、乙酰辅酶a 羧化酶（）、过氧化物酶体增殖物激活受体（）、过氧化物酶体增殖物激活受体（）基因的mrna 相对表达量，采用primer 6.0 软件，以-actin 为内参，在qtower3g 荧光定量pcr 仪上进行qrt-pcr 反应，使用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定。

1.5 统计分析 采用excel 2010 对数据进行初步处理，用2法[Δct=ct（目的基因-ct（内参基因）] 测定基因表达量，计算基因的相对表达量，用spss 20.0 分析单因素方差程序进行差异显著性检验，用duncan's 法进行多重比较，结果以平均值± 标准差表示，＜0.05 表示差异显著，用graphwad prism 5 软件制作基因的相对表达量的柱形图，用pearson 检验相关性分析。

2.1 丁香和槐角提取物对三黄鸡生长性能的影响 由表2 可知，日粮中添加丁香和槐角提取物增加三黄鸡的末重、adfi、adg，降低f/g；与对照组相比，150、200、300 mg/kg 提取物组分别增加5.81%、10.32%、4.52%（＜0.05），adg 分别增加9.60%、16.29%、7.11%（＜0.05），f/g 分别降低6.78%、11.40%、5.29%（＜0.05）；150、200 mg/kg 提取物组adfi 较对照组分别增加2.15%、3.06%（＜0.05）。

表2 丁香和槐角提取物对三黄鸡生长性能的影响

2.2 丁香和槐角提取物对三黄鸡血清抗氧化指标的影响由表3 可知，200 mg/kg 提取物组血清sod、gshpx、cat 活性较对照组分别增加23.21%、48.31%、82.98%（＜0.05）；各组间t-aoc 活性、mda 含量均无显著影响。

表3 丁香和槐角提取物对三黄鸡血清抗氧化指标的影响

2.3 丁香和槐角提取物对三黄鸡血清血脂代谢指标的影响 由表4 可知，80 日龄，饲粮添加丁香和槐角提取物可增加三黄鸡血清hdl 含量，200 mg/kg 提取物组中血清hdl 含量较对照组增加66.15%（＜0.05），各组血清tg、gho、ldl 含量均无显著影响；120 日龄，200 mg/kg 提取物组血清gho 含量较对照组降低27.49%（＜0.05），hdl 含量较对照组和300 mg/kg提取物组分别增高60%、36.05%（＜0.05）。

表4 丁香和槐角提取物对三黄鸡血清血脂代谢指标的影响 mmol/l

2.4 丁香和槐角提取物对三黄鸡肌肉组织脂质代谢基因相对表达量的影响 由图1 可知，200 mg/kg 提取物组腿肌中acc、基因的mrna 表达水平高于对照组（＜0.05）；200 mg/kg 提取物组腿肌中基因的mrna 表达水平高于对照组和300 mg/kg 提取物组（＜0.05）；150 mg/kg 提取物组腿肌中基因的mrna 表达水平显著高于对照组和300 mg/kg 提取物组（＜0.05）；但各组间基因mrna 的表达水平无显著影响。

图1 丁香和槐角提取物对三黄鸡腿肌脂质代谢基因相对表达量的影响

由图2 可知，200 mg/kg 提取物组胸肌组织中、基因的mrna 表达水平高于对照组（＜0.05）；150、200 mg/kg 提取物组胸肌组织中基因的mrna 表达水平高于对照组（＜0.05）；但各组基因mrna 的表达水平无显著影响。

图2 丁香和槐角提取物对三黄鸡胸肌脂质代谢基因相对表达量的影响

3.1 丁香和槐角提取物对三黄鸡生长性能的影响 生长性能作为评定养殖收益的标准之一。赵艳飞研究发现，日粮添加0.01%、0.02%、0.04% 复合植物提取物（黄酮2.31%，总皂苷1.42%）均能显著增加三黄鸡的adg，并降低其f/g。肖传明等研究发现，在白羽肉鸡日粮中添加200 g/t 富含黄酮、生物碱等有效成分的中草药提取物饲料添加剂可增加白羽肉鸡的adg 及降低其f/g。本试验结果也表明，日粮中添加200 mg/kg能显著增加三黄鸡的adfi 及adg，并能显著降低f/g，可能是所用丁香和槐角提取物所含的有效成分具有杀菌抑菌作用，其能改善三黄鸡肠道健康状况，提高试鸡对疾病的抵抗能力，从而提高了生产性能。

3.2 丁香和槐角提取物对三黄鸡血清抗氧化指标的影响wang 等研究发现，黄芪多糖植物提取物可显著增加海兰褐蛋鸡血清gsh-px 活性，降低血清mda 含量。杜天玺研究发现，断奶仔猪基础日粮中添加红车轴草提取物可有效抑制由于免疫应激所致的sod、gshpx 活性降低。王志祥等研究表明，日粮中添加黄芪提取物能显著增加肉鸡血清sod、gsh-px 活性。本试验结果也表明，日粮中添加200 mg/kg 丁香和槐角提取物能增加血清sod、gsh-px 及cat 活性，且能够改善机体抗氧化性能，原因可能是丁香和槐角提取物含有黄酮类（具有抗菌、抗病毒、抗过敏作用）、多酚类（具有清除自由基、调节体内氧化酶活性作用）、皂苷类、维生素类等抗氧化活性物质，这些物质抑制自由基产生，进而提高机体抗氧化力。

3.3 丁香和槐角提取物对三黄鸡血清血脂代谢指标的影响 葛洪伟等研究发现，仙人掌提取物能显著降低广西麻鸡血清胆固醇含量。段凯文等研究发现，日粮添加200 mg/kg 百里香酚和八角茴香植物提取物可显著降低感染产气荚膜梭菌雏鸡血清cho 含量，显著增加hdl 含量。本试验结果也表明，日粮中添加200 mg/kg 丁香和槐角提取物可显著增加80 日龄肉鸡血清hdl 含量，显著降低120 日龄肉 鸡血清cho 含量。原因可能是丁香和槐角提取物含有黄酮类、多酚类、皂苷类、维生素类等抗氧化活性物质，其中黄酮类是许多植物的主要抗氧化成分，其具有抗菌、抗病毒、抗过敏等生理活性或药力作用，多酚类物质可以直接清除自由基、调节体内氧化酶活性，能诱导机体抗氧化酶表达，从而抑制过多自由基产生，进而提高机体抗氧化力。

3.4 丁香和槐角提取物对三黄鸡肌肉组织脂质代谢基因相对表达量的影响 cui 等研究发现，fas 与北京油鸡肝脏脂肪含量高度相关，在胸肌和腿肌组织中的表达水平则相对较低。而本试验结果表明，fas 与体脂含量呈正相关，胸肌和腿肌组织中fas 含量随添加量增加而增加，原因可能与家禽品种差异有关，也可能受添加剂量的影响。关于丁香和槐角提取物对机体基因表达影响的报道较少，不足以表明丁香和槐角提取物对机体基因有调控作用。武俊紫等研究发现，富硒灵芝能够抑制非酒精性脂肪（nafld）大鼠肝脏中基因的mrna 表达水平。消痰化瘀类植物提取物通过下调基因mrna 表达水平，从而减少大鼠的肝脏脂质沉积。张向杰等研究发现，在肉鸡饲粮中单独或配合使用山楂叶总黄酮和何首乌二苯乙烯苷均能降低肉鸡肝脏组织中基因mrna 表达水平，从而改善肉鸡血清脂质代谢。主要在脂肪细胞中高度表达，是脂肪生成的主要调节因子，其表达水平对机体内脂质代谢和脂肪细胞分化有重大影响。研究表明，人参三七川穹提取物能显著上调的表达。本试验结果表明，饲粮中添加200 mg/kg 丁香和槐角提取物对胸肌和腿肌组织中基因的mrna 表达水平有显著作用，而基因mrna 表达水平随添加量增加而增加。

本研究结果表明，饲粮中添加丁香和槐角提取物能够促进三黄鸡生长发育，有效降低腹脂率，增强抗氧化性能，能显著上调三黄鸡腿肌组织中基因的mrna 表达水平和胸肌组织中基因的mrna 表达水平，但腿肌组织中和胸肌组织中基因的mrna 表达水平无显著影响，因此丁香和槐角提取物对三黄鸡胸肌和腿肌组织中和基因的mrna表达水平均有一定调控作用。在本试验条件下，以饲粮中添加200 mg/kg 丁香和槐角提取物效果较佳。