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石蜡包埋人体组织STR检验的探讨

栏目:医学论文发布:2009-03-27浏览:2681下载270次收藏

【摘要l目的探讨普通甲醛对人体组织dna的影响及提高str检出率的手段。方法取少量石蜡包埋组织,65℃水浴脱蜡,
chelex一100法提取dna,pcr扩增,循环次数分别为28次和28+6次,扩增产物经310型测序检测。结果普通甲醛固定5 d以内的
组织基本上可检出amel及15个str基因座。固定时间延长,检出率下降;pcr循环次数增加,灵敏度增加,但有错误分型的情况。
结论普通甲醛固定时问长短直接影响pcr—str的检验。减少模板量有利于pcr反应成功,pcr次数为28+6时,灵敏度增加,但
应谨慎判读结果,以免错误分型。
【关键词】石蜡包埋组织;dna提取;str
【中图分类号】d919.2
【文献标识码】b
【文章编号】1007—9297(2006)01—0050—03
在某些民事案件中。成功对石蜡包埋组织进行
pcr—str分型来判断其归属问题。对案件的解决起到
重要作用。目前国内医院及科研机构大多使用普通
10%甲醛固定人体组织。普通10%甲醛固定石蜡包埋
的组织中dna降解相对严重,提取高质量的dna并
进行pcr—str分型较为困难。实践中人体组织固定
时间长短不一,但以1周左右多见。本文的目的是探
索普通10%甲醛固定时间对pcr—str分型的影响以
及提高检出率的适当方法。
材料与方法

、材料
石蜡包埋人体组织均取自本所病理室。5个无关
个体的心、肾组织用1o%普通甲醛固定5 d、8 d、12 d
和15 d以上时.剪取组织边缘甲醛完全浸润处。石蜡
包埋,常规切片he染色,显微镜下观察确保组织结构
清晰,无自溶、坏死和大片出血后,作为本研究材料使
用。
二、方法
1.预处理。切取8 ixm厚的石蜡包埋组织,尽量剔
除石蜡部分,放入0.5 ml离心管中;或挖取小米粒大
的石蜡包埋组织,放入0.5 ml离心管中。加入500
ddw,65c【=保温10min脱蜡,弃除液体。【 】
2.dna的提取。向每个离心管中加入150

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